Личинки нематод рода Anisakis

Краткая характеристика личинок 3-й стадии. Личинки свёрнуты в пло­скую спираль, располагаются в прозрачных или полупрозрачных, бес­цветных или слегка желтоватого цвета, тонких цистах (иногда их можно найти в свободном состоянии, поскольку к моменту обнаружения они, ви­димо, не успели образовать цисту) (рис.

Рис. 5.6. Личинка Anisakis sp. из сельди: слева - передний конец тела; справа - головной конец тела, апикально (а - сверлильный зуб; б - экскреторная пора) (из: Gibson, 1970)

Рис. 5.7. Личинка 3-й стадии Anisakis Type 1: зад­ний конец тела с изогнутым мукроном (ro:_Weerasooriya et al., 1986).

В качестве примера мерных характеристик личинок одного из представителей рода Anisakis приведу данные, заимствованные из нескольких работ зарубежных коллег (табл. 5.1).

Таблица 5.1. Размеры личинок Anisakis simplex (3-й стадии) из рыб, в мм

(А - из: Rolbiecki, Rokicki, 2002; Б - из: Abollo et al., 2001; В - из: Chai et al., 1986;

Г - из: Sun et al., 1991)

^[1] По другим данным, длина тела личинок A.

В старой литературе анизакисных личинок, регистрируемых у рыб, описывали под разными названиями: Ascaris marina, A. salaris, A. simplex, A. sphyranurae, Ascaris sp., Anisakis marina, Capsularia marina, Stomachus marina и даже Eustoma rotundatum. В 70-х - 90-х годах 20-го столетия их чаще всего именовали Anisakis simplex или же Anisakis sp., а также Anisakis sp. larva (1) или же Anisakis sp. Type I larva (то же, что Anisakis simplex), Anisakis sp. larva (2) или же Anisakis sp. Type II larva (то же, что A. physeteris). Японские авторы различали 3 типа личинок: Anisakis sp. I, Anisakis sp. II и Anisakis sp. III. Первый из них соответствовал A. simplex из евро­пейских вод, второй - Anisakis Type II, а третий тип был обнаружен толь­ко однажды (эта личинка имела короткий желудочек, как у Anisakis sp. II, и маленький мукрон на хвосте, как у Anisakis sp. I).

Многие исследователи считают, что наиболее стабильные морфо­метрические признаки личинок Anisakis, паразитирующих в рыбах на 3-й стадии, это: расстояние от головного конца до нервного кольца, а также величина отношений длины тела к её ширине, длины тела к длине пище­вода, длины тела к длине желудочка и длины тела к длине хвоста (собств. наблюдения; Багров, 1985; Chai et al., 1986). Помимо того, личинок A. simsimplex (Anisakis sp. Type I) отличают от A. physeteris (Anisakis_sp. Type II) по форме заднего края желудочка в месте его перехода в кишечник: у пер­вого из них он скошенный, у второго - прямой.

Казалось бы, морфометрические критерии для отнесения анизакисных личинок к конкретной взрослой форме найдены. Но уже в 1982 г. было показано, что для идентификации личинок Anisakis пригодным альтерна­тивным методом может оказаться метод энзим-электрофореза (Agatsuma, 1982). В частности, при помощи этого метода была исследована актив­ность ферментов глюкозофосфатизомеразы (ГФИ) и фосфоглюкомутазы (ФГМ) в экстрактах личинок Anisakis sp. обоих типов - Type 1 и Type 2, паразитирующих у восточной скумбрии и японского солнечника соответ­ственно. В результате был показан значительный полиморфизм ГФИ. В естественных популяциях обоих типов личинок этот энзиматический ло­кус встречается, по меньшей мере, в виде 5 аллелей, 3 из которых оказа­лись общими для обоих типов. Заметных различий в частоте их встречае­мости не выявлено, но каждую из личиночных форм можно легко отли­чить одну от другой по электрофоретической подвижности ФГМ.

В свете последних изменений в таксономическом составе рода в результате применения генетических методов (см. раздел 2.2), предлагае­мые для определения личинок морфометрические признаки, видимо, сле­дует рассматривать как несколько устаревшие, тем более, что один и тот же тип личинок может быть присущ представителям нескольких родов. Например, личинки 2-го типа могут оказаться представителями и A. physe­teris и A. brevispiculata, и, к тому же, встретиться в одном и том же хозяи­не, как это было показано, например, для восточноатлантической мерлузы (Mattiuci et al., 2001). Более того, недавно установлено, что анизакисные личинки из некоторых рыб, соответствующие по своей морфологии Type I, т.е. традиционно определяемые как A. simplex, генетически принадлежат к A. typica. Сказанное относилось к нематодам от синего тунца и ауксиды из вод Бразилии, от восточноатлантической ставриды и восточной скумбрии из вод Мадейры, от королевской макрели, корифены, малого восточного тунца и восточной пеламиды из прибрежных вод Сомали, а также от вос­точноатлантической мерлузы из восточной части Средиземного моря (Mattiucci et al., 2002). Заметим, что у одного из перечисленных хозяев, а именно у восточноатлантической мерлузы могут паразитировать личинки ещё одного, уже третьего, представителя Anisakis - A. pegreffii (Nascetti et al., 1986).

Скорее всего, в ближайшее время перед специалистами будет сто­ять задача разработки новых критериев для оценки видового статуса ли­чинок рода Anisakis.

Учитывая те изменения, которые произошли в составе рода Anisakis довольно трудно анализировать информацию и о встречаемости этих ли­чинок у рыб. В этой связи подчеркну ещё раз, что основной целью данной монографии является не ревизия таксономического статуса анизакид и их личинок, а обобщение и анализ современного состояния их изученности, вызванные к жизни практической значимостью этих гельминтов и отсут­ствием в отечественной литературе подобной сводной информации. По этой причине в тексте монографии в основном оставлены те видовые на­звания личинок, под которыми они описаны в соответствующих работах. К тому же, довольно часто авторы предпочитают доводить определение личинок только до родового уровня, что вполне объяснимо, учитывая от­сутствие надёжных видовых критериев на морфометрическом уровне. В тех же случаях, когда видовое название личинки уже уточнено и та при­брела новый таксономический статус, это обязательно оговаривается.

Роль рыб в жизненном цикле Anisakis. Относительно роли рыб в жизненном цикле нематод рода Anisakis существуют разные точки зрения. Одни авторы рассматривали рыб промежуточными хозяевами (Grabda, 1973; Smith, 1971), другие - резервуарными (Багров, 1983, 1985; Smith, Wooten, 1978), третьи - паратеническими (Moravec, 1994; Podolska, 1995а), четвёртые - транспортными (Koie, 2001), пятые - промежуточными (при заражении личинками 2-й стадии) и резервуарными (при заражении ли­чинками 3-й стадии) (Кулачкова, 1976).

В последние годы всё большую популярность среди исследовате­лей приобретает точка зрения о том, что рыбы в жизненном цикле анизакисов служат только паратеническими хозяевами, поскольку в их орга­низме не происходит развития личинок от 2-й к 3-й и от 3-й к 4-й стадии (Moravec, 1994; Podolska, 1995а и др.). Большую роль в этом сыграли экс­периментальные работы по расшифровке жизненного цикла данных нема­тод (см. раздел 2.4). Культивирование in vitro личинок Anisakis показало, что линька личинки 3-й стадии (именно на этой стадии личинки паразити­руют в рыбах), её переход в 4-ую стадию и дальнейшее развитие возмож­ны только при температуре 34 - 37°C, т. е. в организме теплокровного жи­вотного. Однако, по нашему мнению, для оценки роли рыб в жизненном цикле нематод рода Anisakis более подходит предложенное Кёй (Koie, 2001) определение их в качестве транспортных хозяев.

Анализируя роль трески в жизненном цикле A. simplex в Балтий­ском море, Подольска (Podolska, 1995а) замечает, что заражение этих хищных рыб личинками 3-й стадии происходит через сельдь - основного пищевого объекта трески. Та же, в свою очередь, получает анизакисных личинок на той же 3-й стадии развития при питании ракообразными, глав­ным образом, эвфаузиидами. Кстати, в прибрежных водах Балтики сельдь служит основным источником заражения анизакисными нематодами, по­мимо трески, также и судака, поскольку составляет значительную часть его пищевого рациона (Feiler, Winkler, 1981).

Возможность попадания личинок нематод от одного вида рыбы к другому или же от головоногих моллюсков к рыбе и последующего их выживания в новом хозяине подтверждена экспериментально. В опытах по заражению пикши личинками A. simplex, полученными из лосося, а мерланга - личинками из атлантической сельди, выяснилось, что немато­ды проникают через стенку желудка или пилорических придатков в по­лость тела рыб-реципиентов уже через 24 ч после заражения. Через 34 ч вокруг некоторых личинок наблюдалось образование тонкой капсулы (пе­ред скармливанием нематод, полученных от рыб-доноров, освобождали от капсулы, в которую они были заключены) (Smith, 1974). Прижились нема­тоды из атлантической сельди и у мальков кумжи (Larsen et al., 2002). Дос­таточно успешно закончились опыты по заражению личинками A. simplex 3-й стадии камчатского лосося: при внутрибрюшинном введении прижи­лось 74 % личинок, однако при пероральном - только 9 % (Santamarina et al., 1994). В обоих случаях большинство личинок располагались на пило­рических придатках рыб, а их инкапсуляция завершилась в течение 40 дней. При последующем культивировании инкапсулированных личинок, полученных из экспериментально заражённых лососей, выяснилось, что их способность к линьке не отличалась от таковой личинок, выделенных из естественно заражённой путассу. Даже пресноводных рыб можно зара­зить личинками Anisakis sр. (Wootten, Smith, 1975). При интубации личи­нок, полученных из морских рыб, в желудок кумжы и радужной форели выяснилось, что некоторые личинки проникали в полость их тела уже в течение 2 ч.

И, наконец, некоторых рыб можно отнести к числу случайных хо­зяев личинок Anisakis. Как правило, это крупные хищные рыбы, и, прежде всего, хрящевые, а также некоторые пресноводные виды, отлавливаемые в прибрежных, опреснённых участках моря. Нематоды попадают к ним вме­сте с добычей, но поскольку вероятность того, что эти рыбы когда-нибудь станут добычей окончательных хозяев анизакисов, т. е. китов и ластоно­гих, ничтожно мала, то для паразита попадание к ним практически являет­ся тупиком в его развитии. Вместе с тем, учитывая тот факт, что продол­жительность жизни личинок Anisakis в рыбах превышает два года, в тече­ние которых они не теряют своей инвазионности, и принимая во внимание вероятность гибели этих рыб от разных причин, в результате чего немато­ды могут оказаться во внешней среде, нельзя не исключать возможности их попадания в новых, но уже подходящих хозяев (см. рис. 2.10).